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大鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞的原代培養(yǎng)及取材事項(xiàng)

更新時(shí)間:2022-10-21點(diǎn)擊次數(shù):1357
  什么是大鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞的原代培養(yǎng)?嚴(yán)格地說原代細(xì)胞培養(yǎng)是指從動物機(jī)體取出的組織經(jīng)各種酶、螯合劑或機(jī)械方法處理,分散成單細(xì)胞,選用合適的培養(yǎng)基在體外進(jìn)行的首次培養(yǎng),也叫初代培養(yǎng)。通常把一代至十代以內(nèi)的培養(yǎng)細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。
  
  原代細(xì)胞培養(yǎng)主要包括取材→分離→培養(yǎng)等三部分。原代培養(yǎng)是建立各種細(xì)胞系的開始,是實(shí)驗(yàn)人員需掌握的一項(xiàng)基本技術(shù)。原代培養(yǎng)的細(xì)胞其生物學(xué)特性未發(fā)生很大變化,接近和能反映體內(nèi)生長特性,仍具有二倍體遺傳特性,因此適用于藥物敏感性試驗(yàn)、細(xì)胞分化、細(xì)胞生長代謝等實(shí)驗(yàn)研究。
  
  大鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞取材應(yīng)該注意什么?
  
  動物體內(nèi)大部分的組織細(xì)胞都可以在體外培養(yǎng),但其難易程度與組織類型、分化程度、供體年齡、供體健康狀態(tài)、原代培養(yǎng)方式等有直接關(guān)系,也是決定原代培養(yǎng)成敗的關(guān)鍵。
  
  因此原代取材我們應(yīng)滿足以下要求:
  
  1、取材時(shí)注意無菌操作,使用的手術(shù)器械、培養(yǎng)皿以及試劑都應(yīng)保證無菌;
  
  2、使用的手術(shù)器械應(yīng)鋒利,使其在剪碎組織的時(shí)候盡可能減少對細(xì)胞的機(jī)械損傷;
  
  3、對組織樣本帶有血液、脂肪、結(jié)締組織的,在處理組織時(shí)應(yīng)盡可能去除這些非目的組織;
  
  4、如無特殊要求,可采用更加容易培養(yǎng)的組織進(jìn)行培養(yǎng),提高培養(yǎng)成功率;
  
  5、取材過程盡量要快,保證組織新鮮;
  
  6、原代培養(yǎng)應(yīng)采用應(yīng)用豐富的培養(yǎng)液,一般添加5%-20%胎牛血清;
  
  7、對組織的來源、部位、取材時(shí)間、處理方法以及供體的一般情況都需做好記錄。