大鼠軟骨細(xì)胞分離自正常大鼠軟骨組織，軟骨細(xì)胞主要功能：軟骨是人身體中不會(huì)發(fā)生的組織；骨骼在發(fā)育初期大部分是由軟骨構(gòu)成的；軟骨一般起到承重負(fù)荷，減少關(guān)節(jié)間骨骼摩擦等作用。
前面我們講述過軟骨細(xì)胞的制備方法，但是在制備過程所使用的試劑有哪些，這你們知道嗎？我相信很多人都是不知道的。下面，欣潤(rùn)生物就來詳細(xì)講述一二。
大鼠軟骨細(xì)胞制備過程中主要的試劑：
1、PBS：每袋加ddH2O定容至1000ml，調(diào)pH7.2，高壓滅菌消毒。
2、DMEM細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)液：臨用前根據(jù)需要加10%胎牛血清，1%的ITS，按1％體積分?jǐn)?shù)加入雙抗貯存液（青霉素+鏈霉素），使青霉素和鏈霉素的終濃度分別為100U／mL和100U／mL，置于4℃冰箱保存。
3、抗生素：青霉素（80萬U）和鏈霉素（100萬U）在無菌操作臺(tái)內(nèi)以高壓滅菌過的雙蒸水溶解（分別加入4ml滅菌水/青霉素，5ml滅菌水/鏈霉素），配制成20萬u/ml分裝，置于-20℃冰箱保存，臨用時(shí)4℃解凍。
注意：盡量避免反復(fù)凍融，并使培養(yǎng)基濃度為100u/ml。
4、細(xì)胞凍存液：生長(zhǎng)培養(yǎng)基（含20%胎牛血清）或100%胎牛血清，加入10%的DMSO混合均勻，置于4℃冰箱保存。
注意：大鼠軟骨細(xì)胞接種后48H再換液，這樣細(xì)胞才帖牢不掉。第三、四天多觀察，細(xì)胞在會(huì)爆發(fā)式增殖。
更新時(shí)間：2022-07-11
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